Das Little Sisters Orphanage ist eine Zufluchtsstätte bzw. Zuhause für die Little Sisters aus Rapture. Es wurde von Frank Fontaine an mehreren Orten in Rapture gegründet, wie Hestia oder Plaza Hedone. Fontaine benutzte das Waisenhaus als Vorwand, kleine Mädchen für die Transformation in eine Little Sister zu bekommen, sodass sie zu ADAM produzierenden Organismen wurden. Es ist sehr wahrscheinlich, dass der Name "Little Sister" sich von dem Namen des Waisenhauses ableitet. Öffentliche Bekanntmachungen forderten die Eltern auf, ihre Mädchen in die Obhut des Waisenhauses zu geben, denn dort gäbe es kostenlose Bildung, Nahrung und Fürsorge. Dem gingen besonders die ärmeren Einwohner nach.
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